Estudio mediante técnicas moleculares del tanatomicrobioma intestinal en la estimación del intervalo post mortem temprano empleando un modelo de ratón / Early post mortem interval estimation in a mouse model using molecular analyses of the gut thanatomicrobiome

Introducción: en la actualidad, la falta de métodos cuantitativos fiables ha llevado a distintas líneas de investigación a buscar un modelo que prediga el intervalo post mortem (IPM). El tanatomicrobioma, presente desde el momento de la muerte, parece sufrir cambios predecibles y que siguen una correlación con el IPM.Materiales y métodosse ha analizado experimentalmente el comportamiento del tanatomicrobioma en la región del intestino delgado posterior y del colon ascendente durante las primeras 24 h de descomposición en Mus musculus. Para ello, se ha llevado a cabo una aproximación molecular basada en el análisis del gen ribosomal 16S (ARNr 16S) mediante electroforesis en gel con gradiente desnaturalizante (DGGE) y, seguidamente un análisis de la alfa y beta diversidad.Resultadoslos resultados basados en el análisis de los índices de diversidad ecológica reflejaron cambios estadísticamente significativos antes de las 12 h, y un descenso de la diversidad a partir de esas 12 h postmortem, siendo este estadísticamente significativo en las 2 regiones intestinales analizadas. Por otro lado, el estudio comparativo de las comunidades microbianas mostró que cambian estructurada y diferenciablemente desde el momento de la muerte, alejándose en similitud de las mostradas en vida (IPM 0 h).Discusiónestos resultados coinciden con el descenso de la diversidad sugerido a largo plazo por distintos autores. Sin embargo, en las condiciones del estudio, se ha visto que este descenso no se inicia hasta las 12 h. Conclusión como conclusión, se han podido establecer, según los cambios en la diversidad bacteriana, fases de la dinámica bacteriana durante la descomposición que podrían ayudar a mejorar los modelos de correlación microbiana para la estimación del IPM. (AU)

Introduction: Currently, the lack of reliable quantitative methods has led different research lines to find a model that predicts the postmortem interval (PMI). The thanatomicrobiome, present from the moment of death, has been shown to change in predictable ways, allowing a correlation with PMI.Materials and methodsIn this study, the shifts of the thanatomicrobiome in the region of the posterior small intestine and the ascending colon in Mus musculus during the first 24 hrs of decomposition have been analyzed experimentally. For this purpose, a molecular approach based on the analysis of the 16S ribosomal gene (16S rRNA) and a denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) was adopted, followed by analyses of the ecological diversity indices Alpha and beta diversity.ResultsThe results based on the analysis of the ecological diversity indices reflected statistically significant changes before 12 hrs, and a decrease in diversity after 12 hrs postmortem, this being statistically significant in the two intestinal regions analyzed. Moreover, the comparative study of microbial communities indicated distinct and structured changes from the moment of death, with shifts in the degree of similarity from the composition detected in life (PMI 0 hrs).DiscussionThese results agree with other studies demonstrating a decrease in microbial diversity. However, under the conditions of the study, this decrease does not begin until 12 hrs after death. Conclusions: In conclusion, by examining the dynamics of bacterial diversity our study has identified phases during decomposition that could help to improve microbial correlation models for PMI estimation. (AU)

Insectos de importancia forense en cadáveres de cerdo (sus scrofa ) en La Paz Bolivia / Forensic insects in pig carcasses (sus scrofa) in La Paz Bolivia

Resumen:La Entomología Forense es una ciencia que implica el estudio de las especies antropofágicas que practican un ciclo vital en el cadáver. Contribuye en la determinación del Intervalo posmortem. Los insectos de importancia forense que se estudiaron pertenecen a la orden Dípteros y Coleópteros. En el estudio realizado en el municipio de Pucarani, ubicado en la provinciaLos Andes del Departamento La Paz a 3852 m.s.n.m. entre otoño e invierno, se obtuvo dos ejemplares de cerdo S. scrofa, en dos ambientes: abierto (cerdo A) y cerrado: (cerdo B). Se identificó 339 especímenes entre dípteros y coleópteros. No se encontraron diferencias significativas en la sucesión de entomofauna entre ambos ambientes, sin embargo predominó la familia Fannide sp. en el lugar cerrado por ser un ambiente húmedo. Los dípteros de mayor importancia son: Sarconesia Chlorogaster, Clorobrachycoma splendida, que pertenecen a la familia Calliphoridae, que se mantuvo en constante actividaden su estadio larval y su forma adulta en los cuatro estados de descomposición a temperaturas de 14 - 16°C, humedad relativa de 30%; no se encontró a Calliphora nigribasis en la descomposición avanzada; Sarconesiopsis magellánica solo se presenta en la etapa Fresco. Entre los Coleópteros: Oxelitrum apicale apareció desde la etapa hinchado. La sucesión de entomofauna cadavérica y su particularidad en cada etapa de descomposición, es el elemento que nos ayudaría a determinar el IPM, que dependerá de las condiciones climáticas a gran altitud como Bolivia.

Abstract:Forensic entomology is a science that involves the study of the cannibalistic species that plays a vital cycle in the body. It helps to determinate the postmortem interval. Insects with forensic importance that were studied belong to the order Diptera and Coleoptera. In the study conducted in the Municipality of Pucarani, located in the province of Los Andes La Paz Department at 3852 meters between autumn and winter, two copies of pork S. scrofa was obtained in two environments: open (pork A), closed (pig B). 339 specimens between Diptera and Coleoptera were identified. No significant differences were found in the entomofauna sequence between the two environments, however the Fannide sp. In the place closed for being a humid environment. The most important dipterans are: Sarconesia Chlorogaster, Clorobrachycoma splendida, belonging to the family Calliphoridae, which remained in constant activity in its larval stage and its adult form in the four decaying states at temperatures of 14 - 16 ° C, humidity Relative to 30%; Calliphora nigribasis was not found in advanced decomposition; Magellanic sarconesiopsis only occurs in the Fresco stage. Among the Coleoptera: Oxelitrum apicale appeared from the swollen stage. The succession of cadaveric entomofauna and its particularity in each stage of decomposition is the element that would help us determine the MPI, which will depend on high altitude climatic conditions like Bolivia.